三七鑒別方法有哪些，三七鑒別方法有哪些，怎么分辨三七粉真假好壞

今天，“匯美云七”農小哥給大家分享： 三七鑒別方法有哪些， 三七鑒別方法有哪些，怎么分辨三七粉真假好壞

三七鑒別方法有哪些

三七鑒別方法有哪些（三七有效成分快速鑒別的方法） 一種基于nmr波譜法對三七有效成分快速鑒別的方法 技術領域 1。本發明涉及一種基于nmr波譜法對三七有效成分快速鑒別的方法，屬于分析檢測技術領域。

背景技術：

2。三七(panax notoginseng)，為五加科人參屬植物，是中國傳統名貴中藥材。

因其具有散瘀止血、消腫定痛、抗炎和抗氧化等功效，因此，在藥品、化妝品、保健品等領域有廣泛應用。

三七主要功效成分為三七總皂苷(total panax notoginseng saponins，tpns)，含量占全株植物7％左右，絕大多數tpns的化學結構屬達瑪烷型四環三萜皂苷。

三七根的主要單體皂苷包括人參皂苷rg1、rb1、rd和三七皂苷r1，含量約占tpns的80％。

3。植物原材和提取物的質量直接關系到制成品功效。

目前市售三七根提取液產品的鑒別與定量多采用tlc、hplc、gc等方法。

盡管色譜類方法具有檢測靈敏度高等優點，然而實際應用中，由于植物源樣品成分復雜，色譜峰分離度低，往往需要繁復的樣品預處理步驟，分析過程耗時長費用高。

同時，此類天然產物的標準對照品多數不易獲得，價格昂貴，也限制了方法的廣泛應用。

另外，由于實際樣品中成分的復雜性，植物源樣品鑒別也經常采用指紋圖譜對檢材整體評價，這種非靶向分析方法不能給出確切的成分信息。

質譜(ms)能闡釋物質的化學結構，液質聯用(hplc-ms)技術為植物源產品鑒別與定量分析提供了有力支持。

然而在快速鑒別領域，由于這類檢測的樣品制備程序繁瑣，數據解讀復雜而不具優勢，如被檢測成分定性也需要有相應標準品；色譜柱固定相對樣品溶液相ph、溫度有適用范圍要求等。

以上對hplc應用于復雜被測對象—植物源樣品分析—帶來一定困難。

4。核磁共振波譜技術具有重現性好、非破壞性、非特異性和可定量等優點，在植物初級代謝物或特異代謝物(如酚類、生物堿、萜類、聚酮化合物、生氰糖苷、芥子油苷、香豆素、鞣質、苯并惡唑類等)的研究中已獲得非常廣泛的應用，液體nmr已是表征植物樣品提取物中極性、半極性或非極性化合物結構的通用工具。

但是植物源樣品1h nmr存在譜峰重疊嚴重、譜圖復雜的特點，故很難直接用于實際樣品的鑒定。

為了克服這類問題，人們提出了許多新型的核磁檢測技術。

例如姜陽明等采用cpmg脈沖序列采集杜仲的特征化合物松脂醇二葡萄糖苷的1h nmr譜，對譜圖作craft分析提取到杜仲1h nmr譜的特征信號，并用于杜仲產地鑒別。

鑒于植物源樣品成分的復雜性，也有對標準植物檢材采集1d nmr圖譜，構建nmr指紋譜庫，以非靶向分析建立鑒別模型的技術。

nmr非靶向分析一般采用微步徑積分法處理圖譜，對數據聚類分析進而達到鑒別的目的。

非靶向分析具有操作簡便易行的特點，在實際工作和三七產品鑒定中具有廣泛的應用前景，然而該方法不能明確指證其中有效成分。

5。hsqc-tocsy核磁共振譜是一種hsqc法與tocsy法相結合的一種2d nmr相關實驗。

在hsqc-tocsy譜圖中既顯示一鍵1h-13 c偶合(hsqc)，還顯示了整個自旋體系中的相關性(tocsy)。

例如藤榮偉等在分析大葉吊蘭苷a時，采用hmqc-tocsy法成功歸屬分子中糖基部分的結構。

hmqc與hsqc方法稍有區別，同為觀察一鍵1h-13 c偶合。

hsqc-tocsy譜法在復雜糖類和肽類化合物結構分析應用較廣泛。

鑒于目前尚沒有適合于三七產品快速鑒定的理想方 11進行處理。

20。在本發明的一種實施方式中，所述自旋共振信號群通過 13 c nmr譜全歸屬的基礎上獲得。

21。在本發明的一種實施方式中，所述 13 c nmr譜數據采集條件：脈沖序列zgpg30；采樣時間(aq)1.36s；時間域(td)64k；掃描次數(ns)4096；弛豫時間(d1)2s，譜寬(sw)24038.4hz。

22。本發明還提供了上述方法在檢測領域的應用。

23。有益效果：

24。本發明操作步驟簡單，可以對三七植物原材及其制成品快速靶向鑒別。

25。本發明基于三七植物原材有效成分—三七總皂苷(total panax notoginseng saponins，tpns)，其中的主要單體皂苷具有共同母核結構——帶側鏈烯-24達瑪烷環三七鑒別，本方法實現了對三七有效成分快速靶向鑒別，以2dhsqc-tocsy譜圖是否顯示三七總皂苷特征自旋共振信號群，判斷所檢測產品是否真實含有三七有效成分，本方法指標值 13 c化學位移的檢測誤差δδ≤0.02(n＝5)。

附圖說明 26。圖1為所采集hsqc-tocsy譜圖。

27。圖2為所采集 13 cnmr譜圖。

28。圖3為所采集1hnmr譜圖。

具體實施方式 29。下面結合實施例對本發明作進一步的描述，但本發明的實施方式不限于此。

30。實施例1參數優化 31。(1)hsqc-tocsy譜數據采集參數自旋鎖定(spin lock)時間d9需優化，以保證采集數據性噪比足夠高，相關峰系在譜圖顯現。

32。固定其它譜圖采集和數據處理條件(同實施例2)，以d9為單一變量，分別修改d9為20、30、40、50、60、70、80、100、120ms，觀察相關峰的峰容積變化，并用其它nmr方法交叉驗證相關峰。

研究發現，當d9為50～80ms時，能夠取得三七皂苷特征自旋共振信號群，即能夠同時檢出四條峰系，因此，最終確定d9優化參數為50～80ms。

33。(2)當待測樣品為三七提取液時，其中固體小柱品牌和規格、甲醇的洗脫體積需優化，以保證盡可能除去助溶劑而目標提取物不致損失。

34。平行將市售三七提取液吸附于固體小柱，單因素觀察甲醇洗脫體積的影響。

采用甲醇分別洗脫2、4、6、8、10ml，采用氣相色譜儀測定助溶劑在洗脫液中含量，紫外可見分光光度計測定三七總皂苷在洗脫液中含量。

繪制洗脫曲線，計算助溶劑累計清除率、三七總皂苷總損失量，研究發現，當甲醇洗脫體積為6～8ml時，助溶劑累計清除率為》90％、三七總皂苷總損失量為《5％，滿足要求，故優選洗脫體積為6～8ml。

35。(3)當待測樣品為三七根時，其中提取液乙醇濃度和大孔吸附樹脂柱的類型需優化，以保證目標提取物提取率高而共存雜質被清除。

36。具體參照(2)制定優化方案。

平行將市售三七根粉末用不同濃度乙醇溶液浸提，單 因素觀察乙醇濃度對三七總皂苷提取率的影響。

采用乙醇濃度分別為0、20、40、50、70、90％，紫外可見分光光度計測定三七總皂苷在浸提液中含量。

最終乙醇優選濃度60～80％。

37。選用5種不同類型的大孔吸附樹脂(x-5，ab-8，nk-2，d3520，d101)進行處理，考察不同樹脂對三七總皂苷的保留率。

最終確定使用d3520或d101純化三七根乙醇浸提液，三七總皂苷保留率》80％。

38。實施例2：三七提取液中三七有效成分的快速鑒別 39。(1)樣品前處理。

固相萃取小柱是依次用甲醇、20％(v/v)甲醇水溶液和超純水淋洗進行活化，精密吸取適量三七提取液原樣，滴加上樣到已活化固相萃取小柱，使其中tpns吸附于固相小柱同時分去原液中助溶劑。

用7ml甲醇淋洗小柱三次以洗脫tpns。

收集全部洗脫液，于55℃水浴揮發甲醇溶劑，再冷凍干燥，獲得白色凍干粉末即為三七根提取液的凈化富集產物。

40。(2)核磁共振波譜分析。

[0041]1h nmr譜數據采集條件：脈沖序列zg30；采樣時間(aq)4.08s；時間域(td)64k；掃描次數(ns)64；弛豫時間(d1)5s；譜寬(sw)6393.9hz。

13 c nmr譜數據采集條件：脈沖序列zgpg30；采樣時間(aq)1.36s；時間域(td)64k；掃描次數(ns)4096；弛豫時間(d1)2s，譜寬(sw)24038.4hz。

[0042] dept譜數據采集條件：脈沖序列deptst135；采樣時間(aq)2.03s；時間域(td)64k；掃描次數(ns)512；譜寬(sw)16129.0hz。

[0043] 2d nmr譜數據采集譜寬與1d nmr氫譜、碳譜譜寬一致。

[0044] hmbc譜數據采集脈沖序列hmbcgpndqf；cnst13為8hz。

[0045] hsqc譜數據采集脈沖序列hsqcedetgpsp。3；cnst2為145hz。

[0046] hsqc-tocsy譜數據采集脈沖序列hsqcdietgpsis。2；設譜寬(6393.9hz，24038.4hz)，弛豫時間2s，采樣時間0.16s，自旋鎖定(spin lock)時間d9為60ms。

譜圖數據采用軟件bruker topspin 3.6。2和mestrenova 11進行處理。

[0047] 在 13 c nmr譜全歸屬的基礎上，觀察hsqc-tocsy譜是否顯示有三七皂苷特征自旋共振信號群，即沿譜圖縱向的4條相關峰系：峰系1為 13 cδ125.8-δ36.1-δ22.8；峰系2為 13 cδ88.8-δ39.0-δ26.5，或δ78.8-δ39.1-δ27.4；峰系3為 13 cδ70.0-δ49.5-δ30.6，或δ70.0-δ48.9-δ31.5；峰系4為 13 cδ56.2-δ34.9-δ18.3，或δ77.8-δ61.2-δ44.7，三七提取液所采集的hsqc-tocsy譜圖、 13 cnmr譜圖、1hnmr譜圖分別如圖1～3所示，觀察到存在以上相關峰系，即可確定樣品含有三七有效成分。

[0048] 實施例3：三七根中三七有效成分的快速鑒別 [0049] 樣品前處理。

三七根經粉碎成粗粉。

稱取適量，用75％的乙醇超聲波提取三七粗粉中有效成分三七鑒別，提取液濃縮后上d101大孔吸附樹脂柱，水洗除去雜質三七鑒別三七藥材薄層鑒別圖譜，再以75％的乙醇洗脫，洗脫液經減壓濃縮、真空干燥得凈化富集產物。

[0050] 核磁共振波譜分析。

方法同上實施例1。

[0051] 在 13 c nmr譜全歸屬的基礎上，觀察hsqc-tocsy譜是否顯示有三七皂苷特征自旋共振信號群，即沿譜圖縱向的4條相關峰系。

峰系1為 13 cδ125.8-δ36.1-δ22.8；峰系2為 13 cδ88.8-δ39.0-δ26.5，或δ78.8-δ39.1-δ27.4；峰系3為 13 cδ70.0-δ49.5-δ30.6，或δ70.0-δ48.9-δ31.5；峰系4為 13 cδ56.2-δ34.9-δ18.3，或δ77.8-δ61.2-δ44.7，觀察到存在以上相關 峰系，即可確定樣品含有三七有效成分。

[0052] 實施例4：方法的準確性的驗證：

[0053] 首先采用標準對照品制備三七總皂苷混合標準液，其中含有單體皂苷為人參皂苷rg1、rb1、rd和三七皂苷r1。

精密稱取四種單體皂苷各60mg，溶于1500μl氘代溶劑。

完全溶解后均分為三份。

一份即時使用，另兩份凍存。

按與實施例1相同的實驗條件與檢測參數，在一個月內分三次采集hsqc-tocsy、1h、 13 c核磁共振譜實驗數據。

譜圖數據采用軟件bruker topspin 3.6。2和mestrenova 11進行處理，對數據做化學位移校準、基線校正、相位調整，1h、 13 c譜圖數據投影hsqc-tocsy譜圖坐標。

hsqc-tocsy譜圖顯示沿譜圖縱向的4條相關峰系，記錄相應化學位移δ( 13 c)并計算三次實驗化學位移δ( 13 c)平均值及rsd。

結果顯示指標值 13 c化學位移的檢測誤差δδ≤0.02(n＝5)。

[0054] 雖然本發明已以較佳實施例公開如上，但其并非用以限定本發明，任何熟悉此技術的人，在不脫離本發明的精神和范圍內，都可做各種的改動與修飾，因此本發明的保護范圍應該以權利要求書所界定的為準。

三七鑒別方法有哪些，怎么分辨三七粉真假好壞

三七鑒別方法有哪些（怎么分辨三七粉真假好壞） 三七鑒別方法有哪些 特征：1、三七主根呈圓錐形或類圓柱形；2、表面灰褐色或灰黃色，有斷續的縱皺紋及支根痕，頂端有莖痕，周圍有疣狀突起；3、斷面灰綠色、黃綠色或灰白色，心部微呈放射性狀排列；4、體重，質堅實；5、氣微，味微苦回甜。

三七的顯微鑒別 三七根的橫截面：木栓層為數列木栓細胞，栓內層不明顯。

在韌皮部薄壁組織中，有樹脂道散生，形成環狀，有時呈波狀彎曲，木射線寬廣，木質部有導管1-2列縱向排列。

本品薄壁細胞含有淀粉粒，射線細胞中尤多，草酸鈣簇晶稀少。

常見三七偽品與三七的差異 三七來源于五加科植物的干燥根，冠以三七名的藥材涉及11科21種植物，這些品種比較混亂，某些地區甚至常年冒充三七使用，盡管有的藥材部分功效與三七的某些功效相近，但其植物來源和化學成分差別很大，即使有幾種來源于五加科植物，但其主要成分的皂苷也不相同，因此不能作為三七藥材使用。

常見偽品有竹鞭三七、大葉三七、藤三七、血三七。

怎么分辨三七粉真假好壞 顏色：純三七粉，顏色主要呈現灰黃色或接近灰黃色。

1。顏色過于偏黃或者太黃的三七粉，很有可能是用三七絨根打磨加工的。

三七絨根雖然是三七一部分，但是功效作用與三七主根相差甚遠； 2。顏色接近白色小麥面的三七粉，很有可能摻入了米粉。

用口嘗會有大米的味道，當然，米味不會太明顯，要不然就成往米粉里面摻三七粉了。

3。顏色泛綠的三七粉，多半是加入了三七桿葉。

三七桿葉雖然也有藥效，但功效和價格也與三七主根相差甚遠。

味道：用手指蘸少量三七粉放于舌尖，抿嘴品嘗，味苦回甘是最基本的。

1。苦——到口不到喉。

真三七粉入口極苦，但會馬上回甜。

也就是說三七粉不能苦到喉嚨里去，苦味在舌根部分就逐漸消失淡化了。

如果嘗三七粉的時候感覺喉嚨都是苦的或者有辛辣的味道，那您可以毫不猶豫地下結論，這就是假的三七粉！ 2。甘——不可過于甜。

三七畢竟是中藥材，回甜只是淡淡的。

一般帶苦回甜的中藥材不可能像吃糖那樣有濃濃的甜味，只是有一股苦中回甜的感覺。

品嘗三七粉時如果有某種粉加入糖的感覺，那肯定是假的了。

3。不能有嘗面粉或者米粉的感覺 4。三七是土生土長的，即使粉身碎骨了也一定去不掉那股子土味。

因此真三七粉都帶一點點土腥味，只不過這需要很靈敏的嗅覺和味覺才能感覺到。

體積：三七粉的密度比較大，體積比較小，特別是超細三七粉。

無論是往三七粉里摻入米粉、面粉、三七葉、三七桿，其體積必然比真三七粉大，用固定體積的容器一量就知道真假。

當然，真三七粉容積也會因粉的粗細程度而有所區別。

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關鍵詞： 三七 三七粉的功效和作用