三七總皂苷對腦卒中的作用，三七總皂苷對阿霉素致心肌損傷保護作用的研究

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三七總皂苷對腦卒中的作用

從三七莖葉、花、果梗中得到的水提總皂苷結晶，在美國、日本、臺灣、香港地區稱為三七葉黃素。

通過對三七根、莖葉和花蕾化學成份系統研究表明；其地上部分的人參二醇類皂苷含量遠高于地下部分。

三七莖葉中含有10多種皂苷和黃酮類成分，與目前臨床上一些常用的心腦血管疾病改善藥物相比，三七莖葉中含有的各種活性成分有著別具一格的作用機制。

三七莖葉中含有皂苷類與黃酮類在協同作用下具有神奇功效；擴張血管、增加血流量、改善心腦血管循環，在缺氧情況下保護腦和心肌細胞，延緩腦細胞死亡，修復大腦神經元。

同時，可以降低血中的甘油三酯，并提高密度脂蛋白含量、提高血紅細胞超氧化物歧化酶的活性。

三七總皂苷對阿霉素致心肌損傷保護作用的研究

三七總皂苷對阿霉素致心肌損傷保護作用的研究 三七為五加科人參屬植物三七Panaxn otoginseng(Bu rk。)F。H 。Chen的干燥根，是我國特產的藥材。

傳統醫學中認為其具有散痕止痛、消腫活血的功效。

近年來臨床研究中發現，三七對于多種原因造成的心肌損傷有保護作用，其活性成分三七皂苷(Pa naxr notoginsengsaponins， PNS)，在缺血性心臟病的改善中得到成功應用，其作用機制可能與提高心肌細胞抗氧化能力，改善細胞能量代謝有關。

由于 缺 血 性心臟病和阿霉素致心肌疾病都與細胞能量代謝紊亂有關，筆者推測三七皂苷可能對阿霉素致心臟損傷具有保護作用。

本研究采用阿霉素急性心臟毒性模型和離體培養的心肌細胞分別評價 三七皂苷的保護作用，同時觀察了三七皂苷對阿霉素抗腫瘤活性的影響，為進一步擴大三七的臨床應用提供依據 三七皂苷對阿霉素致心肌損傷保護作用實驗準備 藥物和試劑三七藥材購自云南文山，由浙江大學藥學院賀慶副教授鑒定，樣品保存于浙江大學中藥系。

三七皂苷(PNS )由本實驗室提取。

經HPLC分析，PNS中人參皂苷Rb，，R g ，，R d ，Re 和三七皂苷R：的總含量約91%。鹽酸多柔比星注射液，浙江海正藥業股份有限公司生產，批號060904。

乳酸脫氫酶(lactated ehydrogenase，LD H)試劑盒(批號06060101)、肌酸激酶(cr eatinek inase， CK )試劑盒(批號07010101)、肌酸激酶同工酶(mbisoenzyme ofcreatinek inase， CK MB)試劑盒(批號06080101)均購于寧波亞太生物技術公司。

過氧化氫酶(catalase，CAT)試劑盒(批號20070302)、超氧化物歧化酶( superoxide dismutase ， SOD)試劑盒(批號20070302)、谷朧苷膚(glutathionep eroxidase，G SHPx)試劑盒(批號20061220)均購于南京建成生物工程研究所。

DMEM完全培養基(批號1384657)，胎牛血清(批號613864)為Gibe。

公司產品。

超級新生牛血清(批號20070415)為SeRaBio公司產品。

1.2 動物及細胞清潔級ICR小鼠，雄性，體重(20 t2) g，由浙江省實驗動物中心提供，合格證號：CSXK2003-0001。

大鼠心肌細胞H9CZ 、人紅白血病細胞K562、人口腔上皮癌細胞KB、人乳腺癌細胞MCF一由中國科學院上海細胞所細胞庫提供 三七皂苷對阿霉素致心肌損傷保護作用實驗方法 2.1 動物分組、給藥及造模40只小鼠隨機分為5組，每組8只，分別為：正常對照組，阿霉素模型組，3個劑量的PNS干預組(25，50，100 mg·kg-‘)。

給藥及造模方案：正常對照組以0.02mL“g-’每日灌胃給予生理鹽水，在第5天腹腔注射等量生理鹽水代替阿霉素；阿霉素模型組每日灌胃給予等量的生理鹽水，第5天腹腔注射15 mg·kg一’鹽酸阿霉素；PNS干預組造模前按0.02mL”g-’體積每日灌胃給予不同劑量的藥物，連續5d，每天1次，第5天給藥1h內腹腔注射15 mg·kg一’鹽酸阿霉素，此后繼續給藥2d。

動物在檢測前禁食12 h，不禁水。

2.2 動物血清及組織指標的測定造模后72 h，戊巴比妥麻醉動物，腹腔靜脈取血；解剖取心臟，稱重，加pH7 。4， 0。 01 m ol·L一’Tirs-HCI溶液，制成5%勻漿。

血清樣品中LDH，CK，CKMB活力使用相應試劑盒按說明書方法測定。

5%組織勻漿使用考馬斯亮藍法確定其中蛋白含量，使用相應試劑盒按說明書方法測定SOD，CA T，GS H-PX的活性 2.3 心肌細胞培養及給藥培養H9C Z細胞(37℃，飽和濕度，95%空氣+5% C02，含10% FBS的DMEM培養基)至狀態穩定，接種于%孔板上，每孔細胞量約為1 x 104個。

24 h后更換培養液，加入不同質量濃度(0，6.25，12.5，25，50，100 mg·L-1)的PNS，1 h后，加入10 pmol·L一’阿霉素或相等量的溶劑。

其 中，不含阿霉素和PNS的處理組作為正常對照組；僅含阿霉素，不含PNS的處理組作為模型組。

培養24h后，用MT 法在波長550 nm處測定吸光度值(A)表示細胞活力。

細胞的相對活力按以下公式計算：細胞相對活力(%)二PNS組(A)/正常對照組(A) x 100% 2.4 腫瘤細胞培養及給藥為了評價PNS對阿霉素抗腫瘤活性的影響，采用三株人源腫瘤細胞，即MCF-7， KB及K562進行實驗。

分別培養MCF-7，KB，K5 62細胞(37℃，飽和濕度，95%空氣+5%C02，含10%超級新生牛血清的DMEM培養基)至狀態穩定，接種于%孔板上，每孔細胞量2x10，個。

24 h后更換其培養液，加人不同質量濃度(0，6.2512。5，25，50，100 mg·L一’)的PNS，1 h后，加人0.1N，mol·L-’阿霉素。

其中，不含阿霉素和PNS的處理組作為正常對照組；僅含阿霉素，不含PNS的處理組作為阿霉素干預組；同時含有PNS和阿霉素的處理組為聯合干預組。

各組含有等量的溶劑DMSO (0.1%)。

細胞培養48 h后，用MT 法在波長550nm處測定A。

細胞生長抑制率按照以下公式計算：

細胞生長抑制率(%)二(正常對照組A一藥物處理組A)/正常對照組Ax100% 2.5 統計處理實驗數據采用SPSS1 1.0 軟件進 行分析，實驗結果用it。

表示，組間比較用Dunnettt檢驗。

P< 0.05 為顯著性差異。

三七皂苷對阿霉素致心肌損傷保護作用結果 3.1 對阿霉素致小鼠急性心肌損傷的影響動物實驗中模型組心肌酶譜各項指標均大幅上升，與正常對照組相比具有顯著性差異(P<0.05)。

而PNS干預組(25，50，10 0m g“ kg -’)與模型組相比，各指標均明顯下降。

中、高劑量組(50，100m g·kg-I)LDH，CK，CKMB與模型組相比均具有顯著性差異(P<0.05)或非常顯著差異(P<0.01)，下降幅度分別達到32.5%， 41.8%， 29.4%及44.2%，39.5%，36.0%。

說明PNS能減輕阿霉素對心肌組織的損傷心肌組織的SOD，CA T，GS H-PX的活性反映組織對抗氧應激的能力。

模型組各種抗氧化酶的水平均較對照組顯著降低(P<。

。05)。

PNS干預組(25，50，100 mg ” kg-‘)與模型組相比，酶的活力有所增高，且顯示一定的劑量依賴關系。

其中，中、高劑量組(50，100 mg " kg-’)各項酶活水平與模型組相比均存在顯著性差異(P

三七總皂苷成為預防和改善心血管疾病的基礎藥物

三七總皂苷成為預防和改善心血管疾病的基礎藥物 心腦血管疾病仍為當今世界第一大病種，心血管病藥物也理所當然地成為世界醫藥市場上排名第一的藥品大類，也是比較經典的一類藥物，心血管藥物與抗生素和抗腫瘤藥物不同，各種藥物使用比較平均，在驅動藥品市場增長的藥物中很少有心血管藥物的身影，但市場相對穩定。

因此，心血管藥物也是世界各大醫藥公司研發的熱點 。

心血管疾病是全世界導致人類死亡的首位疾病。

世界衛生組織估計每年有1750萬人死于心血管疾病和腦卒中（占所有死亡的1/3），而到2030年，這個數字將升至2420萬人，也就是說，32.5%的死亡是由心血管疾病導致。

我國每年死于心血管疾病者近300萬人，而患有各類心血管疾病危險因素的人群數量也已經過億。

目前，人口老齡化，生活水平的日益提高使得我國正進入心血管疾病爆發的“窗口期”，擁有心血管藥物龐大的消費群體 。

三七抗心腦血管疾病出類拔萃 國內醫藥專家認為：中藥制劑具有副作用較小、活血化瘀療效顯著等優點，適合長期服用，故植物提取物制劑引領我國心腦血管病藥物市場也是順理成章之事。

而廣大病人更關心的是藥品的療效和價格，在這兩方面，中藥制劑無疑比西藥更具競爭力。

在上述5大類植物心血管制劑中開發最晚、也是最具市場前景的藥物為三七類制劑。

近年來，三七的研究開發工作已取得重大進展。

三七屬于五加科植物的根，美國科學家稱其為“諾托人參”（Panaxnotoginsen），原來在中藥里三七僅僅作為止血劑使用。

最新藥理研究證實：三七皂苷有多種藥理作用，其中包括改善腦動脈硬化癥、缺血性腦損傷、腦梗塞、腦出血等等。

尤其三七皂苷的抗血小板作用優于現有多種化學合成抗血小板藥物。

根據上述新發現，國內藥企已開發出包括血塞通在內的多種新型心腦血管病藥物，配合強有力的學術營銷手段，三七皂苷類制劑很快成為我國醫院臨床改善心血管疾病的常用藥物品種，銷量直線上升。

中國醫藥商業協會不久前公布的統計資料顯示，2008年，我國醫院中藥類心血管改善劑中，血栓通、血塞通和三七通舒這3只三七皂苷制劑的銷量已分別占醫院中藥類心血管改善劑銷量的60%、34%和4.8%。

尤其是凍干粉劑型的血栓通注射劑更受醫院的歡迎，其銷售額已占醫院中藥類心血管制劑銷量的6成。

這表明傳統中藥一旦加工成現代化制劑可使其脫胎換骨，從而達到銷售更上一層樓的境界從藥物銷售城市以廣州和北京占據首位，2006年他們所占份額將近50%。

發達城市的更注重用藥的安全，選用副作用較小的中藥。

眾所周知，中藥是我國的國粹，中藥類心血管病藥物無疑擁有廣闊市場空間和良好的發展前景。

包括丹參滴丸和三七皂苷類中藥心血管病新制劑已走出國門，進入包括歐美等發達國家的市場，并在國際市場上大放異彩。

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